この段階での体験は以下の3点である:(1)単一の特異的指標にのみ頼ることはできない。もし「証」が単一の特異的指標で表されるならば、それはすでに疾病の診断基準を満たしており、「病」の範疇に入っているということである。腎陽虚証に見られる異常指標の陽性率は60%~85%であり、内分泌軸においても散在的かつ潜在的な変化が見られる。(2)証は総合的な機能状態であり、動的である。発展したり、転換したりすることができる。人体には強力な調整能力があり、フィードバック機構を通じて体を自己恒常性(homeostasis)に保とうとする。病理的な表現は、この調整・制御能力の失調である。(3)臓腑弁証のアプローチでは、病理の発生源にまで推論は可能だが、証に対応する具体的な実体や制御中枢を見つけることはできない。 1980年代半ばから、方剤弁証のアプローチに着手した。中医の伝統は、証効関係から弁証の正しさを判断する。張仲景の「是証は是方を用いる」は、証の存在が薬物によって検証され確認できるということを示している。臓腑弁証は、人体の現れる証候の外象から入る必要があるため、研究対象はすべて人となる。人体研究はサンプル採取に制限がある。第一段階の研究では、腎陽虚証の病理発生源が下垂体であると推論されたが、これはあくまで推論にすぎない。制御中枢が下垂体にあるかどうかを検証するためには、第二段階の薬物検証で下垂体のサンプルが必要となる。これには動物モデルを用いる必要があり、生理性腎虚の高齢マウスおよび外因性グルココルチコイド(コルチゾン)を使用して下垂体-脳下垂体-副腎皮質軸の抑制を模倣した腎陽虚モデルを用いた。これらのモデルは病因が明確で、条件が制御可能であり、標本を随意に採取でき、さまざまな古典方剤を比較研究できるため、病位の解明と腎陽虚証に対する薬物作用の制御中枢の特定に極めて有利な条件を提供した。 1986年に、補腎益寿片が高齢者の血清テストステロンを著明に上昇させることを観察した。一方、四君子湯では効果がなかった。そこで、24か月齢の高齢マウスを補腎群(補腎益寿片投与)と対照群に分け、4か月齢の成人マウスと比較した。下垂体を特に対象としたサンプル採取を行った結果、高齢マウスの下垂体ジヒドロテストステロン受容体親和性は成人マウスよりも著明に低下していた。補腎益寿方薬は高齢マウスの下垂体ジヒドロテストステロン受容体親和性を有効に改善した。これは補腎薬が直接下垂体に作用する可能性を示唆し、腎陽虚証の定位研究の根拠の一つとなった。 1990年に、補腎薬と健脾薬の比較検証研究において、高齢マウスの下垂体TRH、LHR、および下垂体アミン神経伝達物質NE、DA、5-HT、5-HIAAが不同程度に乱れていることが判明した。補腎方薬「寿而康」はこれらの指標を有効に改善したが、健脾方薬は効果が顕著ではなかった。これは補腎薬が下垂体カテコールアミン神経細胞機能の老化を改善するが、健脾薬はそうではないことを示し、腎陽虚証の定位研究の根拠の二つ目となった。
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